一、試驗(yàn)原理:
大腸桿菌/大腸菌群顯色培養(yǎng)基(第二代)是青島海博生物公司再次改良的培養(yǎng)基,用于食品、水、牛奶、冰激凌和肉制品中大腸桿菌和大腸菌群的快速檢測(cè)。大腸桿菌和大腸菌群分別具有特異性的酶,利用其分解底物得到產(chǎn)物的不同來(lái)區(qū)分大腸桿菌和大腸菌群。大腸桿菌顯藍(lán)色至紫色,大腸菌群顯紅色,革蘭氏陽(yáng)性菌被抑制。
二、培養(yǎng)基配方(g/L):
特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) | 33.0 |
顯色劑 | 0.3 |
瓊脂 | 13.0 |
pH 6.8-7.2 25℃ |
三、試驗(yàn)方法:
1.稱(chēng)取本品46.3g加入1000ml蒸餾水,加熱溶解并不停攪拌,煮沸不要超過(guò)1分鐘。取1ml制備好的樣品液加入直徑為9cm無(wú)菌平皿中心,傾入冷卻至45-50℃ 培養(yǎng)基約15ml,混勻,凝固后,再加入一層培養(yǎng)基進(jìn)行履蓋。 或冷卻至45-50℃時(shí),傾入無(wú)菌平皿,瓊脂全部凝固后,在37℃的培養(yǎng)箱中倒置放置1-2小時(shí),加入適當(dāng)稀釋度的樣品液1ml,涂布于培養(yǎng)基上,36℃培養(yǎng)18~24h。
2.選用有30~200個(gè)菌落的平板,計(jì)數(shù)平板上出現(xiàn)的典型大腸菌群和大腸桿菌菌落。大腸桿菌典型菌落為藍(lán)色至紫色,大腸菌群為粉紅色菌落,其它細(xì)菌為無(wú)色或黃色菌落;
總大腸菌群=藍(lán)色菌落+紫色菌落+粉紅色菌落
大腸桿菌=藍(lán)色菌落+紫色菌落。
3.對(duì)可疑大腸桿菌菌落可劃線接種到營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板上,36℃培養(yǎng)12-16小時(shí),挑取單菌落做大腸桿菌全套生化試驗(yàn)(本公司有生化鑒定管套裝4種x4套)。
四、結(jié)果觀察與解釋
在36℃培養(yǎng)18~24h小時(shí):
質(zhì)控菌株 | ATCC | 生長(zhǎng)情況 | 菌落顏色 |
金黃色葡萄球菌 | 25923 | -/+ | 無(wú)色 |
大腸桿菌 | 25922 | +++ | 藍(lán)色 |
沙門(mén)氏菌 | 14028 | +++ | 無(wú)色 |
陰溝腸桿菌 | 23355 | +++ | 粉紅色 |
產(chǎn)氣腸桿菌 | 35029 | +++ | 粉紅色 |
弗氏檸檬酸鹽桿菌 | 43864 | +++ | 粉紅色 |
肺炎克雷伯氏菌 | 10031 | +++ | 粉紅色 |
圖1典型特征:大腸桿菌典型菌落為藍(lán)色至紫色,大腸菌群為粉紅色菌落,其它細(xì)菌為無(wú)色菌落。
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