一、原理介紹

 酵母菌屬真核生物，與細(xì)菌相比，酵母菌具有更完整的呼吸系統(tǒng)，可將糖類（包括糖、醇、苷、甙等）全部氧化分解為二氧化碳和水，而細(xì)菌通常只能將糖類分解為低分子的有機酸等產(chǎn)物。因此，細(xì)菌的糖發(fā)酵試驗常用酸堿指示劑通過顏色的變化檢測某種糖是否能夠被細(xì)菌分解利用，而酵母菌則可以通過杜氏管觀察是否產(chǎn)氣，來判斷酵母菌是否能分解利用某種糖。

二、培養(yǎng)基的配制及接種

 （1）基礎(chǔ)培養(yǎng)基（0.5%酵母液）：稱取0.5g酵母浸粉，加熱溶解于100mL純化水中，分裝至含導(dǎo)管的試管中，每支7.2mL（分裝量依試管尺寸而定，120mm試管可分裝3.6mL），115℃滅菌30min或121℃滅菌15min；

 （2）糖溶液：單糖（如葡萄糖、半乳糖等）或雙糖（如蔗糖、乳糖等）用純化水配制成20%溶液，三糖（如棉子糖）用純化水配制成40%溶液，用0.22μm的微孔濾膜過濾除菌，備用。

 （3）將過濾除菌的糖溶液0.8mL加入至滅菌后的含7.2mL基礎(chǔ)液的試管中（糖溶液：基礎(chǔ)液=1:9即可），混合均勻，并排掉導(dǎo)管內(nèi)氣體；

 （4）挑取活化好的待測菌株至生理鹽水中制成約10⁶-10⁸CFU/mL的菌懸液，吸取0.1mL菌懸液加入至糖發(fā)酵試管中，或用接種環(huán)（針）挑取菌苔直接接種至糖發(fā)酵試管中，25℃培養(yǎng)14天，逐日觀察倒管內(nèi)是否有氣體產(chǎn)生。

三、試驗現(xiàn)象及解釋

 a、b分別為白色念珠菌和釀酒酵母菌的葡萄糖發(fā)酵試驗，倒管內(nèi)充滿氣體，即為葡萄糖發(fā)酵陽性反應(yīng)；c、d分別為白色念珠菌和酵母菌的乳糖發(fā)酵試驗，倒管內(nèi)無氣體產(chǎn)生，即為乳糖發(fā)酵陰性反應(yīng)。

注：強陽性反應(yīng)通常會在數(shù)天內(nèi)觀察到氣體迅速充滿倒管；遲緩陽性反應(yīng)通常要培養(yǎng)7-14天可觀察到氣體充滿倒管；若培養(yǎng)14天后倒管內(nèi)僅有少量氣體，則為弱陽性反應(yīng)；14天后若導(dǎo)管內(nèi)無氣體，則為陰性反應(yīng)。

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